EMSA檢測服務

上傳日期：2017-11-29  閱讀次數：5721

EMSA檢測服務

概述

凝膠遷移或電泳遷移率實驗（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術，可用于定性和定量分析。這一技術最初用于研究DNA結合蛋白，目前已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常將純化的蛋白和細胞粗提液和32P同位素標記的DNA或RNA探針一同保溫，在非變性的聚丙烯凝膠電泳上，分離復合物和非結合的探針。DNA-復合物或RNA-復合物比非結合的探針移動得慢。同位素標記的探針依研究的結合蛋白的不同，可是雙鏈或者是單鏈。當檢測如轉錄調控因子一類的DNA結合蛋白，可用純化蛋白，部分純化蛋白，或核細胞抽提液。在檢測RNA結合蛋白時，依據目的RNA結合蛋白的位置，可用純化或部分純化的蛋白，也可用核或胞質細胞抽提液。競爭實驗中采用含蛋白結合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段（特異），和其它非相關的片段（非特異），來確定DNA或RNA結合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下，依據復合物的特點和強度來確定特異結合。

服務項目：

考察蛋白是否和特定序列結合或者序列是否和蛋白結合。

  

服務內容：

1、從動物細胞、人或動物組織等樣品中提取核蛋白或者重組表達蛋白與核酸混合物

2、用BCA進行蛋白定量

3、EMSA檢測

（1） 核蛋白混合物與探針等進行反應

（2） 預電泳及電泳：聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）分離蛋白樣品

（3） 濕法轉�。˙LOTING：Tank Transfer）

（4） 紫外交聯：交聯波長254nm（Cross Linking）

（5） 雜交孵育：與Biotin結合的SA-HRP孵育

 

客戶提供：受試樣品

 

我們提交：詳細實驗報告

 

服務周期：2周

 

服務收費：根據實驗方案確定，請咨詢

上一篇：生物信息學服務

下一篇：蛋白表達及純化檢測服務