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          服務項目

          免疫學技術

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          EMSA檢測服務

          上傳日期:2017-11-29  閱讀次數:5721



          EMSA檢測服務

          概述

          凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術,可用于定性和定量分析。這一技術最初用于研究DNA結合蛋白,目前已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常將純化的蛋白和細胞粗提液和32P同位素標記的DNA或RNA探針一同保溫,在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,分離復合物和非結合的探針。DNA-復合物或RNA-復合物比非結合的探針移動得慢。同位素標記的探針依研究的結合蛋白的不同,可是雙鏈或者是單鏈。當檢測如轉錄調控因子一類的DNA結合蛋白,可用純化蛋白,部分純化蛋白,或核細胞抽提液。在檢測RNA結合蛋白時,依據目的RNA結合蛋白的位置,可用純化或部分純化的蛋白,也可用核或胞質細胞抽提液。競爭實驗中采用含蛋白結合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特異),和其它非相關的片段(非特異),來確定DNA或RNA結合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下,依據復合物的特點和強度來確定特異結合。

          服務項目:

          考察蛋白是否和特定序列結合或者序列是否和蛋白結合。

            

          服務內容:

          1、從動物細胞、人或動物組織等樣品中提取核蛋白或者重組表達蛋白與核酸混合物

          2、用BCA進行蛋白定量

          3、EMSA檢測

          (1) 核蛋白混合物與探針等進行反應

          (2) 預電泳及電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品

          (3) 濕法轉。˙LOTING:Tank Transfer)

          (4) 紫外交聯:交聯波長254nm(Cross Linking)

          (5) 雜交孵育:與Biotin結合的SA-HRP孵育

           

          客戶提供:受試樣品

           

          我們提交:詳細實驗報告

           

          服務周期:2周

           

          服務收費:根據實驗方案確定,請咨詢




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